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2016/02/23

Preparation of TSB, TSA, MRS, and PDA --製備 TSB, TSA, MRS, PDA 培養基

Preparation of TSB, TSA, MRS, and PDA
--製備 TSB, TSA, MRS, PDA 培養基









TSB: 說明書建議取 30 g 加到 1 L 水中,按這比例,我們用 21 g + 700 mL (因為血清瓶不能裝太滿)

TSA: 若是一般 agar 依照 1.5% 的比例,soft agar 則減半,使用 0.75%

我們這次要製作 pathogen mixture, 使用 10 mL TSA (half agar)

也就是
每瓶 700 mL x 1.5% = 10.5 g agar 一般使用,例如製作培養皿的培養基

          700 mL x 0.75% = 5.25 g agar 給 mixture 使用。


因為 TSB 的粉可以完全溶解,因此若是要配六瓶, 可以先取 21 g x6  一同溶解才依照體積分裝。

但是請記得
1. 粉末有體積,分裝時會多一些些,要想想看該怎麼分配
2. agar powder 不能攪拌溶解,只能在高溫滅菌過程中融化,因此若要配六瓶 TSA, 就必須分別稱量 agar!


後來發現使用 15 mL sterile centrifuge tubes instead of glass tubes, 不但省去不少準備的時間,成本可能只有 25%


這裡可以插入一個 google 試算表,把 broth only, normal agar, soft agar 列出來

試算表文件聯結



TSB (BD) (without agar)
30 g + 1 L water
21 g  + 700 mL

MRS (BD) (without agar)
55 g + 1 L water
38.5 g + 700 mL

PDB (BD) (without agar)
24 g + 1 L water
16.8 g + 700 mL

若平均每個培養皿倒入 15 ~ 20 mL
 700 mL 可以製作 47 ~ 35 個 plates